Đặc điểm hình thể của kí sinh trùng sốt rét
Hình thể chung.
thời đoạn phát triển trong thân thể người:
thời đoạn kí sinh ở trong tế bào gan, trong hồng huyết cầu, kí sinh trùng sốt rét (KSTSR) phát triển qua các tuổi (tiêu bản nhuộm Giemsa - Romanovski):
Trophozoite (còn gọi là thể: dưỡng sinh, tư dưỡng, dinh dưỡng, tự dưỡng):
Trophozoite non (thể nhẫn - ring form):
Một merozoite ngay sau khi thâm nhập vào hồng huyết cầu, phát triển và hình thành không bào.
Nhân của KSTSR màu đỏ, trông như mặt đá của nhẫn, thường ở chỗ vòng mảnh nhất. Bào tương của KSTSR màu xanh, như vòng nhẫn. Khoảng trống ở giữa là không bào, không bào lớn lên nguyên sinh chất bào tương dày lên, nhân to ra. Đặc điểm của thể nhẫn: bào tương mảnh, không có hạt sắc tố, tuổi này rất ngắn.
Dựa vào sự phát triển của nguyên sinh chất, người ta còn có thể chia thể nhẫn ra làm 3 giai đoạn:
Nhẫn tí xíu (tiny ring) hay còn gọi là R1: thể này độ dày nhất của nguyên sinh chất nhỏ hơn 1/2 đường kính nhân.
Nhẫn nhỏ (small ring) hay còn gọi là R2: thể này độ dày nhất của nguyên sinh chất lớn hơn 1/2 và nhỏ hơn đường kính nhân.
Nhẫn lớn (large ring) hay còn gọi là R3: thể này độ dày nhất của nguyên sinh chất lớn hơn đường kính nhân.
Trophozoite phát triển (thể amíp):
Nguyên sinh chất bắt màu đậm hơn, có hạt sắc tố, có chân giả. Khối nguyên sinh chất to dần lên, càng to càng có nhiều hạt sắc tố. KSTSR ở giai đoạn này có nhiều hình thù dị kì, không khăng khăng, tùy thuộc vào sự cử động phóng chân giả của kí sinh trùng.
Nhân to dần lên, không bào lúc đầu to, nhưng sau khi nguyên sinh chất dày lên, thì không bào dần dần thu hẹp lại, hoặc chia ra thành nhiều không bào.
Để phân loại kí sinh trùng sốt rét người ta dựa vào hình thù chân giả: dài hay ngắn, không bào có một hoặc có nhiều. giai đoạn này tương đối dài hơn cả.
Trophozoite già (dinh dưỡng già):
Đến giai đoạn này không bào không còn nữa. Nguyên sinh chất là một khối đặc dày. Nhân to ra để chuẩn bị phân chia. Hạt sắc tố thường tụ lại thành đám.
Schizonte (còn gọi là thể phân liệt, thể liệt sinh hay thể ẩn cư):
Schizonte non (phân chia non):
Nhân đã phân chia thành nhiều mảnh, nhưng nguyên sinh chất chưa phân chia.
Schizonte già (phân chia già):
Đến thời đoạn này nguyên sinh chất đã phân chia và chia đều cho các nhân hình thành các merozoite . Người ta thường dựa vào cách xếp đặt và số lượng của các merozoite trong hồng cầu để phân biệt các loại kí sinh trùng sốt rét. + Gametocyte (giao bào):
Giao bào được hình thành từ các merozoite . Có giao bào đực ( microgametocyte ) và giao bào cái ( macrogametocyte ). Hình thể giao bào đực và giao bào cái của mỗi loài kí sinh trùng khác nhau. Giao bào đực nhân to, xốp, màu đỏ nhạt, nguyên sinh chất màu xanh nhạt, hạt sắc tố màu nâu. Giao bào cái nhân đặc, nhỏ, gọn hơn, màu đỏ đậm hơn, hạt sắc tố nâu xẫm hoặc đen. Hình thể các loại giao bào ở mỗi loài kí sinh trùng sốt rét cũng khác nhau.
thời đoạn phát triển trong thân thể muỗi:
giai đoạn kí sinh trùng sốt rét phát triển ở bao tử, xoang thân và tuyến nước bọt của muỗi (trên tiêu bản mổ muỗi):
Gamete (thể giao tử):
Giao tử hình thành từ giao bào được muỗi hút vào bao tử. Giao tử đực ( microgamete ) có roi và giao tử cái ( macrogamete ) hình cầu.
Zygote (thể hợp tử):
Zygote là sản phẩm của sự dung hợp giao tử đực và giao tử cái. Hợp tử hình cầu, không di động trong vòng 18 - 24 giờ đầu.
Ookinete (thể noãn):
Thể zygote chuyển dạng kéo dài hình sâu có chiều dài 18 - 24 µm và di động được gọi là thể ookinete . Thể này chuyển di đến thành dạ dày muỗi và chui lọt qua lớp tế bào liên ra bên ngoài bề mặt dạ dày rồi định cư ở đó.
Oocyste (thể noãn bào):
Thể ookinete chuyển hình trạng tròn thành hình cầu có lớp màng chun được gọi là noãn bào ( oocyste - tế bào trứng). Noãn bào tăng dần kích tấc và xuất hiện trên dạ dày như những thể hình cầu trong - trong, có kích tấc 40 – 80 µm. Trong noãn bào có nhiều hạt sắc tố. Sự phân bố, kích tấc các hạt sắc tố và màu sắc của chúng là đặc điểm phân biệt từng chủng loại kí sinh trùng sốt rét.
Sporozoite (thoa trùng):
Nhân và nguyên sinh chất của noãn bào phân chia thành các thể dạng hình kim gọi là thoa trùng ( sporozoite ). Thoa trùng hình thoi có kích thước chiều dài khoảng 10 - 15 µm, bác ái ở trọng điểm. Người ta ước tính mỗi noãn bào sinh sản và phóng thích ra khoảng 1.000 thoa trùng. Thoa trùng có thể bắt gặp ở trong xoang thân thể muỗi và đặc biệt có nhiều ở tuyến nước bọt của muỗi trưởng thành.
Phân biệt hình thể của các loài Plasmodium giai đoạn kí sinh trên người.
Cho đến nay phương pháp phát hiện hình thể kí sinh trùng sốt rét bằng kĩ thuật lấy tiêu bản máu giọt dày và giọt đàn nhuộm giemsa (Romanovski) vẫn coi là “chuẩn vàng” để chẩn đoán và phân biệt hình thể các loài Plasmodium.
P.falciparum:
thường ngày chỉ thấy thể nhẫn, thể giao bào ở máu ngoại vi. Các thể khác chỉ có thể thấy ở máu ngoại vi khi bệnh nặng (sốt rét nặng hoặc sốt rét ác tính) hoặc bệnh nhân có quá nhiều kí sinh trùng. Các thể khác không nhiều so với thể nhẫn.
Trophozoite non (thể nhẫn - ring form): nhẫn nhỏ, trung bình từ 1,25 - 1,5 µm. Chiếm khoảng 1/5 - 1/6 đường kính hồng cầu. Nguyên sinh chất mảnh, nhiều khi rất khó nhìn thấy. Nhân tròn, gọn, đôi khi gặp thể nhẫn có hai nhân. Thể nhẫn thường nằm ở rìa hồng cầu, gặp 2 hoặc 3 nhẫn trong một hồng cầu.
Trophozoite phát triển (thể amíp): nhỏ, chiếm 1/2 - 2/3 hồng huyết cầu; hạt sắc tố tụ thành cục; ít cử động.
Trophozoite già (thể dinh dưỡng già): nhỏ như thể amip, không bào mất sớm, nguyên sinh chất là khối đặc, nhân to ra, hạt sắc tố tụ lại thành từng đám.
Schizonte (còn gọi là thể phân liệt, thể phân chia, thể liệt sinh hay thể ẩn cư): kích thước làng nhàng 4 - 5 m. Chiếm khoảng 2/3 hồng cầu. Tạo ra từ 8 - 32 merozoite (trung bình 18 merozoite ). Các merozoite rất bé, xếp đại.
Gametocyte (thể giao bào): khi còn non, gần giống thể trophozoite già, chỉ khác là các hạt sắc tố không giao hội thành cục, mà tản mát. Khi đã trưởng thành có hình lưỡi liềm (quả chuối). kích thước giao bào 9 - 14 x 2 - 5 µm. Nhân thường ở giữa, xung quanh nhân có các hạt sắc tố. Nhuộm tiêu bản tốt, ta phân biệt được giao bào đực và giao bào cái. Giao bào đực có nguyên sinh chất nhạt, màu hơi hồng. Nhân không có giới hạn rõ rệt, hạt sắc tố thô, ít, màu nâu, rải rác từ giữa ra khắp thân. Giao bào cái màu xanh da trời hoặc xanh lơ, hạt sắc tố ít (không quá 18 hạt), tụ họp vào giữa thân, xung quanh nhân.
hồng huyết cầu bị kí sinh:
Quan sát dưới kính hiển vi quang học thông thường: những hồng huyết cầu bị P.falciparum kí sinh nói chung hình dạng không thay đổi, kích thước bình thường, không nhạt màu. Nhuộm Azur và kiềm, thấy những hạt Maurer. Đó là những hạt to, thô, màu đỏ nâu hoặc nâu xẫm, hoặc đen, số lượng ít.
Quan sát trên kính hiển vi điện tử: những hồng cầu bị P.falciparum kí sinh thấy xuất hiện các gai, các gai lớn dần thành các nụ lồi (Knobs) (Hommel M., Semoff S., 1988). Các nụ lồi có vai trò trong giả thuyết dính kết tế bào của cơ chế sinh bệnh sốt rét ác tính.
P.vivax:
Ở máu ngoại vi, có thể thấy tất thảy các thể tuổi phát triển vô giới.
Trophozoite non (thể nhẫn - ring form): lúc đầu kích tấc không quá 1/3 đường kính hồng huyết cầu. Chỉ có một nhân. Thường hay gặp thể này trong vòng 2 - 4 giờ đầu của cơn sốt. Từ 4 - 8 giờ, nhẫn có kích tấc to hơn, khoảng 1/2 đường kính hồng huyết cầu thường nhật. Vòng nguyên sinh chất và nhân đều to hơn. thỉnh thoảng có 2 - 3 thể nhẫn trong một hồng huyết cầu.
Trophozoite phát triển (thể amíp): thể này tồn tại từ 30 - 32 giờ. Có hình thù rất dị thường vì kí sinh trùng cử động và phóng chân giả. Ở những thể còn non, không bào rất lớn, một phía là nhân, một phía là khối nguyên sinh chất dày có chân giả. Hạt sắc tố nhỏ và ít. Khi thể amíp phát triển già hơn hình thù rất kì quặc: chân giả lủa tủa ra tứ phía. Thường có một không bào lớn và những không bào nhỏ do các chân giả dính vào nhau tạo thành.
Trophozoite già (thể dinh dưỡng già): kí sinh trùng co tròn lại, không còn chân giả nữa, không bào biến mất. Hạt sắc tố trong nguyên sinh chất to lên và nhiều hơn tụ lại thành từng đám. Kí sinh trùng chiếm gần tất hồng cầu. Nhân nằm ngoài rìa nguyên sinh chất.
Schizonte (còn gọi là thể phân liệt hay thể phân chia, thể liệt sinh): thể này tồn tại từ 6 - 8 giờ. thoạt đầu nhân phân chia sau đó nguyên sinh chất phân chia, rồi chia đều cho các nhân để tạo thành các merozoite . Số lượng các merozoite được tạo thành từ 8 - 22 (nhàng nhàng 12 merozoite ). Các merozoite nằm sát bên nhau ở trong hồng cầu. Các hạt sắc tố hội tụ thành một cục tương đối chắc ở giữa, cũng có khi gặp 2 cục hoặc hạt sắc tố vẫn rải rác. Trong một hồng huyết cầu thỉnh thoảng có 2 - 3 KSTSR cùng phát triển như nhau hoặc chênh nhau về thời đoạn (do thời kì xâm nhập vào hồng cầu của kí sinh trùng khác nhau). Trong một hồng cầu có số lượng lớn merozoite có thể tới 30 - 40. Ranh giới giữa các kí sinh trùng trong hồng huyết cầu không rõ.
Gametocyte (thể giao bào): giao bào của P.vivax thường có hình tròn, nằm trong hồng cầu đã bị trương to. Giao bào cái to hơn giao bào đực. Giao bào đực có một nhân to, xốp nằm ở giữa khối nguyên sinh chất, màu xanh lơ nhạt. Trong nguyên sinh chất có nhiều hạt sắc tố màu nâu tản mát. Giao bào cái đã phát triển đầy đủ, chiếm tất cả hồng cầu. Nhân nhỏ, gọn, đặc và thường nằm ngoài rìa nguyên sinh chất. Phân biệt các thể giao bào với các thể trophozoite già rất khó khăn, nhất là khi giao bào cái chưa phát triển đầy đủ.
hồng cầu bị P.vivax kí sinh: hồng cầu bị trương to biến dạng và nhược sắc, xuất hiện nhiều hạt nhỏ lốm đốm, màu đỏ, dải đều trong hồng cầu, gọi là hạt Schuffner.
P.malariae:
Trophozoite non (thể nhẫn - ring form): hình dạng, kích thước giống như thể nhẫn của P.vivax . Nhưng chỉ có nhân tiện nhẫn trong hồng huyết cầu.
Trophozoite phát triển (thể amíp): thể này phát triển chậm. Không hoạt động mạnh như P.vivax , do đó chân giả không rõ. Khi còn non có một không bào nhỏ ở gần nhân, dần dần mất đi, kí sinh trùng trở nên đặc. Thể này thường nằm vắt ngang hồng huyết cầu như một dải khăn quàng. Hạt sắc tố khá nhiều, thô, tròn và xẫm, thường tụ hợp ở một bên rìa nguyên sinh chất, phía đối diện là nhân to và dài. Sau 50 - 60 giờ, kí sinh trùng chiếm bít tất hồng cầu, nhưng không bao giờ to quá một hồng cầu thường ngày.
Trophozoite già (thể dinh dưỡng già): hình dải khăn, nằm vắt ngang hồng cầu. Hạt sắc tố ở một phía. Nhân dài ở phía đối diện.
Schizonte (còn gọi là thể phân liệt hay thể phân chia, thể liệt sinh): sau khi hoàn tất sự phân chia, nhân và bào tương tạo ra được từ 6 - 12 merozoite (làng nhàng 8 merozoite ). Những merozoite tương đối lớn (1,5 - 1,7 µm). Chúng xếp xen kẽ tương đối đều xung quanh một đám sắc tố như những cánh hoa.
Gametocyte (thể giao bào): giao bào của P.malariae gần hao hao như giao bào của P.vivax . Chỉ khác là kích thước nhỏ hơn nằm trong hồng huyết cầu không trương to, không đổi thay về hình dạng và màu sắc. Giao bào đực nhỏ hơn giao bào cái, có hạt sắc tố màu nâu. Giao bào cái có hạt sắc tố gần như đen.
hồng cầu bị kí sinh : hồng cầu không trương to hơn hồng cầu thường nhật. Không có sự thay đổi đặc biệt về dạng hình. Trong hồng cầu có những hạt Zieman, là những hạt thô, màu nâu đen, khó nhận dạng.
P.ovale :
Trophozoite non (thể nhẫn - ring form): nhẫn của P.ovale giống như nhẫn của P.vivax, P.malariae , có kích thước từ 1/ - 1/3 đường kính hồng cầu, nhưng nhẫn P.ovale to hơn, nguyên sinh chất dày bao quanh nhẫn. Thường gặp 2 hoặc 3 nhẫn, thậm chí 4 nhẫn trong một hồng cầu.
Trophozoite phát triển (thể amíp): có hình tròn hoặc hình bầu dục. Không có chân giả và không có không bào. kích thước của thể này lớn, thỉnh thoảng chiếm thảy hồng cầu.
Schizonte ( còn gọi là thể phân liệt hay thể phân chia, thể liệt sinh): sau khi hoàn tất sự phân chia tạo ra được 4 - 16 merozoite (làng nhàng 8 merozoite ).
Những hạt sắc tố tụ lại thành từng đám, nhưng không nằm ở trọng tâm hồng cầu như của P.malariae , mà xếp đại giữa các merozoite.
Gametocyte (thể giao bào): giao bào P.ovale có hình trạng rất giống giao bào P.vivax . Để phân biệt 2 loại giao bào này, người ta thường dựa vào sự khác nhau về hình thể của hồng cầu có giao bào kí sinh.
hồng cầu bị kí sinh: hồng cầu trương to, biến dạng, thường có hình góc nhọn hoặc hình bầu dục và mép của hồng huyết cầu có hình tua (răng cưa). Trên hồng huyết cầu xuất hiện những hạt James.
Nhìn chung hình thể của P.ovale rất giống hình thể P.vivax , phân biệt hình thể hai loại KSTSR này tương đối khó.
Bảng so sánh hình thể của các loại kí sinh trùng sốt rét (Tiêu bản giọt mỏng nhuộm Giemsa - Romanovski)
Loại KST Đặc điểm |
P.falciparum |
P.vivax |
P.malariae |
P.ovale |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
Xuất hiện ở máu ngoại vi |
Thường chỉ có thể nhẫn và giao bào. Khi bệnh nặng có thể thấy thể khác. |
vơ các thể ở các tuổi. |
Như P.vivax. |
Như P.vivax. |
Thể nhẫn |
Mới đầu bằng 1/5 - 1/6 đường kính hồng huyết cầu. Sau to lên bằng 1/3 - 1/2. Thường thấy 2 - 3 nhẫn trong một hồng huyết cầu. |
kích thước bằng 1/3 - 1/2 đường kính hồng huyết cầu. đôi khi có 2 - 3 nhẫn trong một hồng cầu. |
hình dáng kích thước như P.vivax . Chỉ có một nhẫn trong một hồng cầu. |
hình dáng kích thước như P.vivax. Thường thấy 2 - 3 nhẫn trong một hồng huyết cầu. |
Thể amíp |
Hình tròn, nhỏ, chiếm 1/2 - 2/3 hồng cầu. Hạt sắc tố tụ lại cục to. |
hình dáng kì dị, to có chân giả dài. Có 1, 2 hoặc 3 không bào. Hạt sắc tố nhiều, nhỏ, hình gậy. |
Hình tròn hoặc hình khăn. Không to hơn hồng cầu. Hạt sắc tố tròn, thô, to. |
Hình tròn hoặc bầu dục. Không có chân giả và không bào. kích thước lớn, đôi khi chiếm cả hồng cầu. |
Thể trophozoite già |
To hơn hồng cầu bình thường. Không có không bào, chân giả. Nhân to chuẩn bị phân chia.
Hạt sắc tố tụ lại thành từng
|
Hình dải khăn vắt ngang hồng cầu. Hạt sắc tố ở một phía. Nhân dài ở một phía. |
||
Thể phân chia |
Nhỏ, không quá 1/2 -
|
To hơn hồng cầu
|
Không to hơn hồng
|
Không to hơn
|
Thể giao bào |
Hình quả chuối. Giao
|
Hình tròn chiếm
|
Như của P.vivax
|
Như của P.vivax
|
hồng huyết cầu bị
|
Không trương to,
|
Trương to, nhược
|
Không trương to,
|
Trương to, hình
|
Hình 8.2: Hình thể P.vivax trên tiêu bản giọt mỏng.
Hình 8.3: Hình thể P.malariae trên tiêu bản giọt mỏng.
Hình 8.4: Hình thể P.ovale trên tiêu bản giọt mỏng.
