Trang

Tài Liệu Chữa Bệnh Đông Y Nhân Gian về các vị thuốc

Tài Liệu Chữa Bệnh Đông Y Nhân Gian về các vị thuốc, bài loại thuốc và Cách chữa bệnh Y học cổ truyền tốt nhất, Tài liệu khí công chữa bệnh Y Đạo

Thứ Hai, 13 tháng 9, 2021

Dengue virus IgM miễn dịch bán tự động

Dengue virus IgM miễn nhiễm bán tự động

MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

Mục đích

Phát hiện kháng thể IgM kháng virus dengue trong huyết thanh hoặc huyết tương.

Nguyên lý

Phát hiện kháng thể IgM đặc hiệu kháng virus dengue dựa trên nguyên lý của kỹ thuật ELISA (miễn nhiễm gắn enzyme) (VD).

CHUẨN BỊ

Người thực hiện

Người thực hành: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

Người nhận định và duyệt y kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.

Phương tiện, hóa chất

Phương tiện, hóa chất như thí dụ dưới đây hoặc tương đương.

Trang thiết bị

Dàn máy ELISA.

Máy ly tâm.

Tủ lạnh 2ºC - 8ºC.

Tủ âm sâu (- 20ºC hoặc - 70ºC) (nếu có).

Micropipette đơn kênh thể tích từ 10 µl đến 1000 µl.

Bộ pipetman 8 kênh (nếu có).

dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

thực hiện xét nghiệm 01 mẫu/lần.

STT

uổng hóa chất, vật tư tiêu hao

Đơn vị

Số lượng

1

Bông

Kg

0,001

2

Dây garô

Cái

0,001

3

Tube đựng bệnh phẩm

Cái

1,000

4

Sinh phẩm chẩn đoán**

Test

16,000

5

Chứng ngoại kiểm âm (nếu có)

ml

0,100

6

Chứng ngoại kiểm dương (nếu có)

ml

0,100

7

Ngoại kiểm (nếu có)*

0.020

8

Đầu côn 1000 µl

Cái

3,000

9

Đầu côn 200 µl

Cái

5,000

10

Giấy thấm

Cuộn

0,100

11

Giấy xét nghiệm

Tờ

2,000

12

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

Tờ

0,001

13

Bút viết kính

Cái

0,020

14

Bút bi

Cái

0,010

15

Cái

0,020

16

Khẩu trang

Cái

0,020

17

găng

Đôi

0,100

18

căng thẳng xử lý dụng cụ

Đôi

0,020

19

áo quần bảo hộ

Bộ

0,005

20

Dung dịch nước rửa tay

ml

8,000

21

Dung dịch nước rửa tay

ml

1,000

22

Dung dịch sát trùng

ml

10,000

23

Khăn lau tay

Cái

0,010

chú giải:

* phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/50 tổng hoài công cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 3 lần/1 năm).

** Nếu chỉ làm 01 mẫu vẫn phải mở 01 lọ kháng nguyên đủ cho 16 giếng bao gồm 11 mẫu bệnh phẩm + 5 mẫu chứng. cho nên nếu làm đơn lẻ 01 mẫu thì 01 bệnh phẩm phải chịu Chi phí cho 15 giếng còn lại.

Bệnh phẩm

Huyết thanh hoặc huyết tương.

Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu đề nghị.

CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo Phương tiện, hóa chất được thí dụ ở trên.

Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh: xem chi tiết phụ lục 2.

khước từ những bệnh phẩm không đạt đề nghị: xem chi tiết phụ lục 6.

Tiến hành kỹ thuật

Bộ sinh phẩm Dengue Duo IgM capture ELISA - Pan Bio (VD).

Các bước

Xét nghiệm định tính dengue IgM

2.1

Để Số lượng sinh phẩm cần dùng ở nhiệt độ phòng 30 phút trước khi làm xét nghiệm.

2.2

Đánh số, sắp đặt bệnh phẩm và viết sơ đồ theo thứ tự.

2.3

Chuẩn bị dung dịch rửa.

2.4

Pha loãng kháng nguyên.

2.5

Pha loãng huyết thanh người bệnh, chứng âm, chứng dương và chứng cut-off.

2.6

Trộn đều lượng kháng nguyên đã được pha loãng với một lượng tương đương Mab Tracer. Phức hợp Antigen - Mab Tracer để ở nhiệt độ phòng trong 1 giờ.

2.7

Cho chứng âm, chứng dương, chứng cut-off và bệnh phẩm đã pha loãng vào các giếng của phiến nhựa theo trật tự hướng dẫn của quy trình.

2.8

Đậy phiến nhựa và ủ.

2.9

Rửa phiến nhựa.

2.10

Lắc nhẹ phức hợp Antigen - Mab Tracer. Nhỏ phức hợp này vào mỗi giếng.

2.11

Đậy phiến nhựa và ủ.

2.12

Rửa phiến nhựa.

2.13

Nhỏ dung dịch hiện màu vào mỗi giếng.

2.14

Ủ phiến nhựa, không đậy và tránh ánh sáng.

2.15

Nhỏ dung dịch dừng phản ứng.

2.16

Đọc độ kết quả ở bước sóng 450 và 620nm trong vòng 30 phút sau khi dừng phản ứng.

NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Kết quả được tính theo Đơn vị PanBio như sau:

Tính giá trị nhàng nhàng của ngưỡng (calibrator) rồi nhân với nhân tố ngưỡng (calibration factor = 0,62). Đây chính là giá trị ngưỡng:

ODCO1 + ODCO2+ ODCO3

CO = 0,62 x _________________________

3

OD bệnh phẩm

Đơn vị Panbio = 10 x __________________

OD giá trị ngưỡng

ﻣ Đơn vị PanBio < 9:="" mẫu="" thử="" âm="" tính,="" trong="" huyết="" thanh="" không="" có="" kháng="" thể="" igm.<="p">

ﻣ Đơn vị PanBio = 9 - 11: Mẫu thử phải xét nghiệm lại.

ﻣ Đơn vị PanBio 11: Mẫu thử dương tính, trong huyết thanh người bệnh có kháng thể IgM.

NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

sơ sót

Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả hoặc dương tính giả, bình thường do:

thực hành sai các bước trong quy trình hướng dẫn.

Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo bởi huyết thanh/huyết tương có nồng độ kháng thể cao.

Dung dịch cơ chất bị nhiễm bởi các tác nhân oxid hoá (thuốc tẩy, ion kim khí v.v…).

Dung dịch dừng phản ứng bị nhiễm bẩn.

Xử trí

tuân đúng các bước quy trình chỉ dẫn của nhà sản xuất và chỉ dẫn về độ ổn định hóa chất xét nghiệm trong bộ sinh phẩm sử dụng.

thẩm tra và vệ sinh máy rửa bộc trực trước và sau khi làm xét nghiệm.

Chia hóa chất (chất cộng hợp, dung dịch hiện màu và dừng phản ứng) vào ống nghiệm sạch trước mỗi lần nhỏ.

Back To Top