ĐỊNH LƯỢNG nhân tố XII (FACTOR XII ASSAY)
(Phương pháp 1 thì)
NGUYÊN LÝ
Thiếu hụt yếu tố XII sẽ làm xét nghiệm APTT bị kéo dài, APTT sẽ được điều chỉnh khi bổ sung huyết tương có nguyên tố XII và mức độ cần bổ sung phụ thuộc nồng độ nhân tố XII có trong huyết tương cần soát. Dựa vào đó, người ta tiến hành APTT của mẫu huyết tương cần soát sau khi cho thêm huyết tương có đầy đủ các nguyên tố đông máu tham dự đường đông máu nội sinh trừ nhân tố XNồng độ yếu tố XII sẽ được tính dựa vào đồ thị chuẩn được thành lập với các nồng độ pha loãng khác nhau của huyết tương chứng.
CHỈ ĐỊNH
bít tất những trường hợp nghi ngờ thiếu hụt nguyên tố X
CHỐNG CHỈ ĐỊNH
Không có chống chỉ định.
CHUẨN BỊ
Người thực hành :
01 kỹ thuật viên xét nghiệm; 01 bác sĩ xét nghiệm Huyết học.
dụng cụ, hóa chất
Tủ lạnh;
Máy ly tâm;
Bình cách thủy 37 o C/ máy đông máu bán tự động/ máy đông máu tự động;
Đồng hồ bấm giây;
Pipette: 50µl,100 µl, 1.000 µl;
Bơm kim tiêm nhựa lấy máu;
Bông, cồn vô trùng, dây garo;
ống thử tan máu kích tấc 75 x 9,5mm;
Ống nghiệm plastic có chống đông citrat natri 3,2% hoặc 3,8%;
Nước cất;
Huyết tương chứng đã biết nồng độ yếu tố XII;
Huyết tương không có nhân tố XII;
Canxi clorua M/40;
Cephalin kaolin.
Người bệnh
Không cần chuẩn bị gì đặc biệt.
Hồ sơ bệnh án
Chỉ định xét nghiệm được ghi rõ trong bệnh án; Giấy chỉ định xét nghiệm ghi đầy đủ thông tin về người bệnh: họ tên, tuổi, gường bệnh, khoa phòng, chẩn đoán, điều trị.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Garo, sát trùng, lấy khoảng 2ml máu tĩnh mạch của người bệnh và 2ml máu tĩnh mạch của chứng thường nhật (nếu không có mẫu chứng thương mại);
Trộn đều máu với chât chống đông citrate natri 3,2% hoặc 3,8% theo tỷ lệ 1 thể tích chống đông trộn với 9 thể tích máu;
Ly tâm mạnh để thu huyết tương nghèo tiểu cầu bệnh và chứng.
+ Trường hợp tiến hành bằng tay:
Pha loãng huyết tương chứng chí ít ở 3 nồng độ: 1/10, 1/20, 1/40;
Pha loãng huyết tương bệnh 1/10;
Xây dựng đồ thị chuẩn : chuẩn bị 3 ống thử tan máu:
Mỗi ống cho vào 100 µl huyết tương chứng ở mỗi nồng độ đã pha loãng, 100 µl huyết tương không có nhân tố XII, 100 µl hỗn dịch cephalinkaolin;
Ủ ở bình cách thuỷ 37 o C trong 2 phút;
Cho thêm 100 µl CaCl 2 M/40; Bấm đồng hồ, theo dõi thời gian đông.
Dựa vào thời kì đông ở các độ pha loãng, ta dựng một đồ thị trong đó trục tung là thời gian đông của các độ pha loãng, trục hoành là hoạt tính của nhân tố cần định lượng. Đồ thị sẽ là một đường thẳng.
Xét nghiệm mẫu thẩm tra : Trong 1 ống thử tan máu chuẩn, cho vào:
100 µl huyết tương bệnh pha loãng 1/10 và 100 µl huyết tương không có yếu tố XII, 100 µl hỗn dịch cephalin - kaolin;
Ủ ở bình cách thuỷ 37 o C trong 2 phút;
Cho thêm 100 µl CaCl 2 M/40; Bấm đồng hồ, theo dõi thời kì đông.
Từ thời kì đông của mẫu huyết tương cần rà soát, qua đồ thị chuẩn, sẽ tính được nồng độ nguyên tố X
+ Trường hợp tiến hành trên máy đông máu tự động:
Chọn chương trình tạo đồ thị chuẩn: máy sẽ tự động pha loãng và cho ra kết quả; Dựa vào chỉ số r để quyết định ưng ý đồ thị này hay không.
Tiến hành định lượng nguyên tố XII của mẫu kiểm tra: chọn chương trình factor XII assay và tiến hành các bước theo chỉ dẫn trên màn hình tùy từng loại máy.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Dựa vào đồ thị chuẩn để tính nồng độ nhân tố XII;
Kết quả: ghi % hoạt tính nhân tố XII vào giấy xét nghiệm;
Điền đầy đủ ngày, tháng năm, kỹ thuật viên tiến hành và thầy thuốc nhận định kết quả xét nghiệm ký tên.
NHỮNG sơ sót VÀ XỬ TRÍ
Mẫu máu bị đông;
Chất lượng huyết tương không có nhân tố XII không đạt chuẩn;
Đồ thị chuẩn không tốt.
Hanya blogger biasa yang suka berkelana di dunia maya mencari seonggok informasi yang kiranya dapat berguna untuk dirinya. Terimakasih telah membacanya.
