ĐỊNH LƯỢNG URÊ - DỊCH CHỌC DÒ
NGUYÊN LÝ
Urê được thuỷ phân tạo thành amoniac và CO 2 nhờ urease xúc tác. Amoniac tạo thành phối hợp với α -cetoglutarat và NADH thành glutamat và NAD + nhờ glutamatdehydrogenase (GLDH) xúc tác. Đo sự giảm mật độ quang của NADH ở bước sóng 340mm.
Urease
Urea + H 2 O --------------- 2NH 4 + + CO 3 2-
NH 4 + + 2- α - cetoglutarat + NADH --------------- GLDH L-glutamat + NAD + + H 2 O
CHUẨN BỊ
Người thực hiện
Bác sĩ hoặc kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên nhành xét nghiệm Hóa sinh
công cụ, hóa chất
dụng cụ
Máy xét nghiệm bán tự động: H5000, 4010, evolution...
Máy tự động hoàn toàn: AU 400, 640, 2700 (hãng Beckman coulter).
Chất thử:
Huyết thanh, huyết tương chống đông bằng heparin, dịch màng phổi, dịch màng bụng, dịch não tủy, nước giải pha loãng 100 lần với nước cất (kết quả nhân với 100). Đối với dịch, nước giải cần ly tâm lấy dịch trong để định lượng.
Thuốc thử:
Thuốc thử 1 (R1) đã pha sẵn
Đệm tris (pH=7,8): 120mmol/l
ADP: 750 mmol/l
Urease: 40 KU
GLDH: 0,4 KU
Thuốc thử 2 (R2) đã pha sẵn.
α-Cetoglutarat: 25 mmol/l.
NADH: 1,2 mmol/l
Khi làm trộn lẫn R1 và R2 theo tỷ lệ hướng dẫn ghi trên hộp.
Dung dịch urê chuẩn.13,3 mmol/l (80 mg/dl).
Người bệnh
Người bệnh cần được giảng giải về ciệc cần thiết làm xét nghiệm.
Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi, mã số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, thầy thuốc chỉ định xét nghiệm, thời giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh phẩm, người nhận mẫu.
Ghi yêu cầu xét nghiệm: Định lượng nồng độ ure.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Lấy bệnh phẩm
Định lượng urê các dịch cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.
Tiến hành kỹ thuật
Cho vào các ống nghiệm cỡ 5ml các theo thứ tự như sau:
|
Thuốc thử |
Ống trắng |
Ống chuẩn/thử |
|
Dung dịch chuẩn/huyết thanh |
|
10 µl |
|
hổ lốn thuốc thử |
1000 µl |
1000 µl |
|
Trộn đều, đọc mật độ quang sau 30 giây (A1). Chính xác sau 60 giây đọc mật độ quang (A2) |
||
Cách tính kết quả:
∆Achuẩn/thử = A2 - A1
C = ∆Athử / ∆Achuẩn x 13,3 (mmol/l)
Chú ý: Có thể tiến hành trên máy bán tự động Stat Fax đã cài đặt chương trình như trên. Khi làm, đo mật độ quang của ống trắng trước. Sau đó đưa vào ống chuẩn máy sẽ tự động đo và tính ra hệ số. Tiếp đó đưa theo thứ tự các ống nghiệm vào máy sẽ tự động đo và tính ra kết quả hiện trên máy hoặc in ra giấy.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Chưa có giá trị tham khảo về urê trong dịch chọc dò
NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
Hanya blogger biasa yang suka berkelana di dunia maya mencari seonggok informasi yang kiranya dapat berguna untuk dirinya. Terimakasih telah membacanya.
