ĐO HOẠT ĐỘ AMYLASE – DỊCH CHỌC DÒ
NGUYÊN LÝ
Amylase thủy phân 2-chloro-4-nitrophenyl-maltotriosid (CNPG 3 ) thành 2- chloro-4-nitrophenol (CNP), 2-chloro-4-nitrophenyl-maltodiosid và glucose (G):
Amylase
5 CNPG 3 ---------------- 3 CNP + 2 CNPG 2 + 3 G 3 + 2 G
Sự phóng thích của CNP từ cơ chất và sự tăng độ tiếp nhận ở bước ống 415 nm của nó tỷ lệ thuận với hoạt độ mylase trong mẫu thử.
CHUẨN BỊ
Người thực hiện
Bác sĩ và kỹ thuật viên được đào tạo chuyên ngành xét nghiệm hóa sinh.
dụng cụ, hóa chất
Máy xét nghiệm bán tự động H5000, 4010, evolution...
Máy tự động hoàn toàn AU 400, 640, 2700 (hãng Beckman coulter). Kit thuốc thử amylase (hãng Becman coulter).
Người bệnh
Người bệnh cần được giải thích về việc làm xét nghiệm.
Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi, mã số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, Bác sĩ chỉ định xét nghiệm, thời giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh phẩm, người nhận mẫu.
Ghi đề nghị xét nghiệm: Xác định hoạt độ mylase trong dịch.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Lấy bệnh phẩm
Định lượng mylase các dịch cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.
Tiến hành kỹ thuật
Cho vào 3 ống thử
|
Ống trắng |
Ống chuẩn |
ống nghiệm |
Thuốc thử |
1 ml |
1 ml |
1 ml |
Nước cất |
10 µl |
|
|
Chuẩn |
|
10 µl |
|
Mẫu thử |
|
|
10 µl |
Lắc đều, ủ 37 0 C trong 5 phút hoặc 10 phút ở nhiệt độ phòng. Đo mật độ quang học ở bước sóng 340 nm so với ống chuẩn để tính kết quả.
Tính kết quả:
Nồng độ ống mẫu: C U = OD U / OD S * C S (U/l)
OD U là mật độ hấp thu của ống mẫu
OD S là mật độ thu nhận của ống chuẩn
C U là hoạt độ mylase mẫu
C S là hoạt độ mylase chuẩn
để ý: Có thể tiến hành trên máy bán tự động Stat Fax đã cài đặt chương trình như trên. Khi làm, đo mật độ quang của ống trắng trước. Sau đó đưa vào ống chuẩn máy sẽ tự động đo và tính ra hệ số. Tiếp đó đưa theo thứ tự các ống nghiệm vào máy sẽ tự động đo và tính ra kết quả hiện trên máy hoặc in ra giấy.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
Giá trị tham khảo: Chưa có giá trị tham khảohoạt độ amylase trong dịch
Hoạt độ amylase huyết thanh: < 220="" u="l">
Hoạt độ amylase nước đái: < 1000="" u="l">
NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
