ĐỊNH LƯỢNG sFlt-1 (Soluble FMS lyke tyrosinkinase - 1)
NGUYÊN LÝ
sFlt-1 là một protein có vai trò đối kháng với PlGF (có vai trò tăng tân tạo huyết quản), vì thế nó làm giảm quá trình tân tạo mạch và được gọi dưới cái tên nhân tố kháng tân tạo huyết quản. Xét nghiệm sFlt-1 (phối hợp với PlGF) được chỉ định trong chẩn đoán sớm và chẩn đoán phân biệt tiền sản giật.
sFlt-1 được định lượng bằng phương pháp miễn dịch sandwich sử dụng công nghệ điện hóa phát quang. sFlt-1 có trong mẫu thử đóng vai trò kháng nguyên được kẹp giữa hai kháng thể, kháng thể thứ nhất là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng sFlt-1 đánh dấu biotin, kháng thể thứ hai là kháng thể đơn dòng đặc hiệu kháng sFlt-1 đánh dấu ruthenium (chất có khả năng phát quang) tạo thành phức hợp miễn nhiễm kiểu sandwich. Cường độ phát quang tỷ lệ thuận với nồng độ sFlt-1 có trong mẫu thử.
CHUẨN BỊ
Người thực hiện
01 cán bộ đại học, 01 kỹ thuật viên chuyên ngành hóa sinh.
Phương tiện, hóa chất
Phương tiện: Máy xét nghiệm như Cobas e411, e170. e601, Architect...
Hóa chất: Hóa chất xét nghiệm sFlt-1, chất chuẩn sFlt-1, chất rà chất lượng sFlt-1.
Người bệnh
Người bệnh cần được giải thích về mục đích của việc lấy máu để làm xét nghiệm. Không sử dụng các thuốc có Biotin chí ít 8 giờ trước lúc lấy máu.
Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ thông tin về tên, tuổi, giới tính, khoa phòng, chẩn đoán của người bệnh và ghi rõ chỉ định xét nghiệm
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Lấy bệnh phẩm
Lấy 3 ml máu tĩnh mạch vào ống không có chất chống đông do xét nghiệm này đề nghị sử dụng huyết thanh.
Sau khi lấy máu, đem ly tâm phút tách lấy huyết thanh.
Bệnh phẩm ổn định 3giờ ở 18-25°C, 8giờ ở 2-8°C, 1 tháng ở -20°C.
Bệnh phẩm chỉ rã đông 1 lần và phải để bệnh phẩm đạt nhiệt độ phòng trước khi phân tích. Để tránh hiện tượng bay hơi, bệnh phẩm, chất chuẩn, chất thẩm tra chất lượng nên phân tách trong vòng 2giờ.
Tiến hành kỹ thuật
Máy phân tách cần chuẩn bị sẵn sàng để thực hành phân tách mẫu: Máy đã được cài đặt chương trình xét nghiệm sFlt-1. Máy đã được chuẩn với xét nghiệm sFlt-1. Kết quả rà chất lượng với xét nghiệm sFlt-1 đạt đề nghị không nằm ngoài dải cho phép và không vi phạm luật rà soát chất lượng.
Người thực hiện phân tích mẫu nhập dữ liệu về thông tin người bệnh và chỉ định xét nghiệm vào máy phân tích hoặc hệ thống mạng (nếu có).
Nạp mẫu bệnh phẩm vào máy phân tách
Ra lệnh cho máy thực hành phân tích mẫu bệnh phẩm - Đợi máy phân tách mẫu theo protocol của máy.
Khi có kết quả cần xem xét đánh giá kết quả sau đó in ít hoặc ghi kết quả vào phiếu xét nghiệm để trả cho người bệnh.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
sFlt-1 thay đổi theo tuổi thai, giá trị tham chiếu như sau:
10 – 14 tuần: 555 – 1445 - 2361 pg/mL
15 – 19 tuần: 470 – 1459 -2785 pg/mL
20 – 23 tuần: 649- 1576 - 2944 pg/mL
24 -28 tuần: 630 – 1449 - 3890 pg/mL
29 -33 tuần: 707 – 1934 - 6688 pg/mL
34 – 36 tuần: 978 – 2972 - 9921 pg/mL
37 tuần: 1671 – 4400 - 11324 pg/mL
Khi làm xét nghiệm, sFlt-1 thường được làm cùng với PlGFvà tính tỷ số sFlt-1/PlGF. thường nhật tỷ số đó như sau:
10 – 14 tuần: 5.21 – 22.7 – 57.3
15 – 19 tuần: 4.32 – 12.6 – 26.9
20 – 23 tuần: 2.19- 6.08 – 14.8
24 -28 tuần: 1.01 – 3.8 – 16.9
29 -33 tuần: 0.945 – 4.03 – 86.4
34 – 36 tuần: 1.38 – 13.3 – 92.0
37 tuần: 3.65 – 26.2 - 138
Lưu ý : Giá trị tham chiếu trên đây được đưa ra dựa trên những nghiên cứu ở thai phụ thuộc chủng tộc Âu - Mỹ. Giá trị này có thể đổi thay phụ thuộc vào chủng tộc, thành thử cần xây dựng giá trị tham chiếu riêng cho nơi vận dụng.
sFlt-1 có thể sử dụng trong một số bệnh lý như tim mạh, ung thư. Song xét nghiệm sFlt-1 tả trong quy trình này dành riêng cho tiền sản giật:
Trong tiền sản giật, sFlt-1 tăng trước khi xuất hiện triệu chứng lâm sàng từ 5 - 8 tuần nên được dùng để chẩn đoán sớm tiền sản giật phối hợp với PlGF giảm và tỷ số sFlt1/PlGF tăng.
Dùng chẩn đoán phân biệt tiền sản giật trong trường hợp thai phụ mắc một số bệnh nội khoa như Tăng huyết áp, Hội chứng thận hư, Lupus ban đỏ hệ thống... trước khi mang thai mà các bệnh này có triệu chứng na ná tiền sản giật.
Dùng trong tiên lượng nguy cơ và quản lý tiền sản giật.
NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
sử dụng nhầm bệnh phẩm: sử dụng huyết tương thay vì dùng huyết thanh. Khắc phục: Người lấy mẫu máu cần nắm rõ đề nghị về bệnh phẩm trước khi lấy máu và lưu ý dùng đúng ống đựng mẫu. Khi nhận mẫu máu, người nhận cũng cần soát xem ống máu có đúng yêu cầu không.
Những yếu tố gây nhiễu cho kết quả xét nghiệm. Kết quả xét nghiệm không bị ảnh hưởng khi:
Huyết thanh vàng: Bilirubin < 25="" mg="dL" hay="" 428="" µmol="L.">
Tán huyết: Hemoglobin <0.5 g="dl.">
Huyết thanh đục: Triglyceride < 1400="" mg="dl.">
Biotin <30 ng="ml." trường="" hợp="" người="" bệnh="" sử="" dụng="" biotin="" với="" liều=""> 5 mg/ngày cần lấy máu xét nghiệm ít nhất 8h sau khi dùng Biotin lần cuối. + Không có hiệu ứng “high-dose hook” (Hiệu ứng mẫu bệnh phẩm có nồng độ cao) khi nồng độ sFlt-1 tới 200 000 pg/mL.
RF <600 iu="mL">
Khắc phục: Có thể hòa loãng bệnh phẩm và thực hành lại xét nghiệm sau đó nhân kết quả với độ hòa loãng (Trường hợp có hòa loãng tự động trên máy thì kết quả không cần nhân với độ hòa loãng do máy đã tự xem).
Hanya blogger biasa yang suka berkelana di dunia maya mencari seonggok informasi yang kiranya dapat berguna untuk dirinya. Terimakasih telah membacanya.
