ĐỊNH LƯỢNG TRIGLYCERID - D ỊCH CHỌC DÒ
NGUYÊN LÝ
lipase
Triglycerid -------------- Glycerol + cid béo tự do
Glycerol kinase
Glycerol + ATP -------------------- Glycerol – 3 – phosphat + ADP
Glycerol-3P Oxidase
Glycerol – 3 P + O 2 ------------------------------- Dihydroxyaceton – P + H 2 O 2
Peroxydase
H 2 O 2 + 4Chlorophenol + 4Amino antipyrin ------------------ Quinonimine + H 2 O
CHUẨN BỊ
Người thực hành
thầy thuốc hoặc kỹ thuật viên được đào tạo về chuyên nhành xét nghiệm Hóa sinh
công cụ, hóa chất
Máy xét nghiệm bán tự động H5000, 4010, evolution...
Máy tự động hoàn toàn AU 400, 640, 2700 (hãng Beckman coulter).
Kit của hãng Human.
Thuốc thử
R1: BUFFER
Chloro – 4 – phenol
Magnesium Chlorid
R2: ENZYM
Lipase
Peroxidase
Glycerol – 3 phosphat oxidase
Glycerol kinase
4 – amino – antipyrin
ATP
R3: Standard
Dung dịch Triglycerid chuẩn: 200mg/dL(2.28 mmol/l)
Working solution: R1 + R2, lắc cho tan đều để ổn định 10 phút, bền 30 ngày 4 o C, đựng trong chai nâu.
Người bệnh
Người bệnh cần được giải thích về việc cần làm xét nghiệm.
Phiếu xét nghiệm
Phiếu xét nghiệm cần ghi đầy đủ các thủ tục hành chính: họ tên người bệnh, tuổi, mã số người bệnh, khoa phòng, tên xét nghiệm chỉ định, khoảng tham chiếu, thầy thuốc chỉ định xét nghiệm, thời giờ lấy mẫu, người lấy mẫu, ngày giờ nhận mẫu bệnh phẩm, người nhận mẫu.
Ghi yêu cầu xét nghiệm: Định lượng nồng độ triglycerid.
CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH
Lấy bệnh phẩm
Dịch chọc dò cần ly tâm thu lấy dịch trong để định lượng.
Tiến hành kỹ thuật Cho vào 3 ống nghiệm
|
Ống trắng |
Ống chuẩn |
Ống thử |
Thuốc thử |
1 ml |
1 ml |
1 ml |
Nước cất |
10 µl |
|
|
Triglycerid chuẩn |
|
10 µl |
|
Mẫu thử |
|
|
10 µl |
Lắc đều, ủ 37 º C trong 5 phút hoặc 10 phút ở nhiệt độ phòng. Đo mật độ quang học ở bước sóng = 500 nm (480 – 520 nm) so với ống chuẩn để tính kết quả.
Tính kết quả: Nồng độ ống mẫu.
C U = OD U / OD S * C S (mg/dL hoặc mmol/l)
OD U là mật độ thu nhận của ống mẫu.
OD S là mật độ tiếp thu của ống chuẩn.
C U là nồng độ Triglycerid mẫu.
C S là nồng độ Triglycerid chuẩn.
Chú ý: Có thể tiến hành trên máy bán tự động, cài đặt chương trình như trên. Khi làm, đo mật độ quang của ống trắng trước. Sau đó đưa vào ống chuẩn máy sẽ tự động đo và tính ra hệ số. Tiếp đó đưa theo trật tự các ống nghiệm vào máy sẽ tự động đo và tính ra kết quả hiện trên máy hoặc in ra giấy.
NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ
thường ngày không có Triglycerid trong dịch chọc dò, khi xuất hiện thường hướng tới hiện tượng vỡ bạch mạch do giun chỉ.
NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
